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Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒

產(chǎn)品介紹及用途：

產(chǎn)品名稱：Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：50T/ 盒

Benzonase核酸酶，是一種核酸內(nèi)切酶，可將核酸降解成2~5個堿基的5‘單磷酸核苷酸，因其能高效降解任何形式（雙鏈，單鏈，線狀，環(huán)狀）的DNA和RNA而沒有蛋白裂解活性，又被稱為“全能核酸酶”。Benzonase核酸酶能有效降低蛋白樣品粘度，去除蛋白樣品中核酸的污染，且無蛋白酶活性殘留，核酸酶活性達1×106 U/mg蛋白。Benzonase核酸酶在降低粘性的同時， 也具有多種其他用途，如：減少了樣品處理時間，增加了蛋白產(chǎn)量，離心時時沉淀和上清分離的更徹底，更便于溶液的離心（尤其是超濾）；提高色譜純化的效率等。
Benzonase核酸酶包括四種，分別為不含任何標簽的Benzonase核酸酶（科研級別）、無內(nèi)毒素Benzonase核酸酶、Strep tagII Benzonase核酸酶（科研級別）和無內(nèi)毒素的Strep tagII Benzonase核酸酶，可適應(yīng)不同下游用途的需求。其中Strep tagII Benzonase核酸酶可在消化完核酸后通過Strep Tactin XT Resin高效去除，而無內(nèi)毒素的兩種Benzonase核酸酶，內(nèi)毒素含量<40EU/mL（按照單位換算量計算為，每1000U中含有的內(nèi)毒素<0.15EU），可適用于藥用級別的研發(fā)和生產(chǎn)。另外，核酸酶殘留可通過我公司開發(fā)的基于 熒光探針的Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒進行評測，15min即可完成檢測，*可檢測到2ng/ml的核酸酶殘留。
單位定義
37℃，pH 8.0反應(yīng)條件下，在30分鐘內(nèi)使△A260 值降低1.0(相當于完全消化37 μg DNA )的酶量定義為一個活性單位。
注意：含大量蛋白、細胞壁、其它鹽分的粗制品，對該酶活性有部分抑制作用，使用時需要增加酶的用量。
應(yīng)用
蛋白提取時去除核酸污染：在重組蛋白純化或組織細胞樣品蛋白提取時，Benzonase核酸酶可有效降低樣品粘度，利于下游操作
與細胞或細菌裂解液配合使用，去除粗提物中的核酸，降低溶液粘性，提高蛋白質(zhì)產(chǎn)量
減少存放的外周血單細胞(PBMC)的結(jié)塊現(xiàn)象
降解核酸，利于不可溶性蛋白復性前高質(zhì)量包涵體制備
有效去除帶負電荷的核酸對雙向SDS-PAGE蛋白樣品的影響，改善蛋白質(zhì)的分離效果，增強2-DE分辨率
疫苗和病毒樣品制備中DNA污染的去除
儲存
置于-20°C，可保存2年。
超強兼容性
全能核酸酶在非常廣泛的條件下，都能保持很高的穩(wěn)定性和消化核酸的活性，這使其能夠與多種細胞裂解液，如RIPA，或含有多種離子和非離子型去污劑、還原劑的蛋白提取試劑等兼容。例如：>100mM的鹽酸胍會完全抑制Benzonase活性，1mM的EDTA會部分抑制Benzonase活性，5mM的EDTA會使活性喪失90%，1mM的PMSF則不會抑制核酸酶活性。 濃度<0.4%的Triton® X-100對核酸酶活性幾乎無影響，<0.4%的脫氧膽酸鈉使核酸酶可保持70%的活性，超過該臨界值之后核酸酶活性會急劇降低，1%的濃度會使活性喪失70%；0.05%的SDS對核酸酶活性幾乎無影響，而SDS濃度在0.1%-1%之間時，核酸酶在變性后活性會急劇降低，可通過增加核酸酶的量使活性得到補償。另外，核酸酶可耐受6M尿素，當尿素達到7M時，核酸酶在變性后活性會急劇降低，亦可通過增加核酸酶的量使活性得到補償。

Benzonase核酸酶殘留檢測試劑盒操作注意事項

1.  試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。

2.  實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

3.  預處理后的樣本無需稀釋，直接取10μL加樣即可。

4.  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻。