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豬γ干擾素(IFN-γ)ELISA*上海滬崢！您做實驗的*伙伴！

英文名稱：PoFAine Interferon γ ,IFN-γ ELISA kit

豬γ干擾素(IFN-γ)ELISA產(chǎn)品優(yōu)勢：

1.精心挑選的抗體，對照品/標準品，顯色劑和酶標板全部為進口產(chǎn)品實現(xiàn)*性能，原材料批量進口加上自配的特殊配方稀釋劑保證高品質(zhì)產(chǎn)品性能的同時兼顧成本。

2..采用先進專利技術(shù)，嚴格按照標準生產(chǎn)方案組裝生產(chǎn)，預(yù)包被微孔板的批內(nèi)和批間變異系數(shù)均小于10 ％。

3.經(jīng)過嚴格交叉反應(yīng)和干擾測試及穩(wěn)定性試驗，實驗結(jié)果穩(wěn)定可靠。

4.明確的敏感度，針對所有樣品類型達到*的性能，廣泛的檢測范圍可以滿足大多數(shù)檢測要求。

5.強大的生產(chǎn)能力和充足的儲備、操作熟練的技術(shù)人員及高效的生產(chǎn)流程，隨時可以組裝出您定制的產(chǎn)品。

6.完善的售后服務(wù)和免費的技術(shù)支持免去您的后顧之憂。

豬γ干擾素(IFN-γ)ELISA實驗步驟：

標本收集:
1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管。
2.血漿：抗凝劑推薦使用EDTA，標本采集后30分鐘內(nèi)于 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測。避免使用溶血，高血脂標本。
3. 其它生物標本：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測
4. 標本應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。
5.標本收集后若不及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃/-80℃電冰箱內(nèi)，避免反復(fù)凍融，1-6月內(nèi)檢測,4℃保存的應(yīng)在1周內(nèi)進行檢測。
6. 如果您的樣本中檢測物濃度高于標準品*值，請根據(jù)實際情況，做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議先做預(yù)實驗，以確定稀釋倍數(shù))。
試驗所需自備物品:
1.  酶標儀(450nm波長濾光片)
2.  高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10μl, 2-20μl, 20-200μl, 200-1000μl
3.  37℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水
4.  吸水紙
檢測前準備工作:
1. 請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。
2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正?，F(xiàn)象，可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制洗滌液。(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應(yīng)為室溫。
3.  標準品: 加入標準品&標本稀釋液1.0ml至凍干標準品中，靜置10分鐘，待其充分溶解后，輕輕混勻(濃度為5000 pg/ml)。然后根據(jù)需要進行倍比稀釋(注：不要直接在板中進行倍比稀釋)。建議配制成以下濃度： 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39.05、0 pg/ml。樣品稀釋液直接作為空白孔 0 pg/ml。如配制2500pg/ml標準品：取0.5ml (不要少于0.5ml )5000pg/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的EP管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
4. 生物素化抗體工作液：實驗前計算當(dāng)次實驗所需用量(以100μl/孔計)，實際配制時應(yīng)多配制100-200μl。使用前15分鐘，以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作濃度。當(dāng)日使用。
5. 酶結(jié)合物工作液：實驗前計算當(dāng)次實驗所需用量(以100μl/孔計)，實際配制時應(yīng)多配制  100-200μl。使用前15分鐘，以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作濃度。當(dāng)日使用。

1.  血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2.  血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。  

3.  尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。  

4.  細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5.  組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6.  標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

 7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

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