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產(chǎn)地 | 國(guó)內(nèi) |
品牌 | |
貨號(hào) | 15-19001 |
用途 | 僅供科研 |
包裝規(guī)格 | 50T/盒 |
是否進(jìn)口 | 否 |
人Y染色體(SRY)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒本產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開(kāi)發(fā),它具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增 SRY 基因。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。
2. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要做 N+2 個(gè)提取,包括一個(gè)樣品制備陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽(yáng)性對(duì)照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL 人 Y 染色體性別決定區(qū)(SRY)PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 100 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后 得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置PCR 反應(yīng)(40μL 體系)
對(duì) N+2 個(gè)樣品,在PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性對(duì)照,故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè)PCR 管中分別加入下列成分:
人Y染色體性別決定區(qū)(SRY)PCR試劑盒
實(shí)驗(yàn)操作
1.模板制備(樣本制備區(qū))
建議使用配套水生動(dòng)物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產(chǎn)品,具體過(guò)程詳見(jiàn)產(chǎn)品說(shuō)明書。
2.添加模板(模板添加區(qū),放置于冰盒上進(jìn)行)
剪下所需測(cè)試數(shù)的已含有反應(yīng)液的PCR管,放置在室溫待解凍后,離心30秒后揭開(kāi)封口膜,向每管反應(yīng)液中分別加入5μL模板,順序?yàn)?/span>NG、待測(cè)樣品模板、PG-VH-P。蓋好配套的PCR管蓋后,渦旋混勻30s,離心1min,立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
3. 擴(kuò)增反應(yīng)(擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū))
使用熒光定量PCR儀,熒光基團(tuán)選擇FAM,淬滅基團(tuán)選擇TAMRA。